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制備型液相色譜儀的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì)

更新時間:2022-07-27      點擊次數(shù):953
  制備型液相色譜儀的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì)。為了縮短分離時間和提高分離效率,制備型液相色譜的的進樣品量很大,導(dǎo)致色譜柱的分離負(fù)荷相應(yīng)加大,因此必須加大色譜柱填料,增大柱內(nèi)徑和柱長,使用的流動相相對增多。然而,當(dāng)色譜柱上的樣品負(fù)載加大時,往往會導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純產(chǎn)品。制備型液相色譜要解決容量與柱效之間的矛盾,對重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟上來說,要少用填料,少用溶劑,盡可能多的得到產(chǎn)品。
  一、樣品的前處理:
  制備型液相色譜柱分離的樣品多,比分析型液相色譜柱更容易受污染,樣品前處理非常必要。
  二、TFA在緩沖液中的作用:
  1、TFA起到類似離子對的作用,一般濃度在0.05%~0.1%。濃度過高會使溶液偏酸,長時間使用可能影響色譜柱壽命。
  2、TFA可抑制硅膠表面的硅醇基,改善堿性化合物的峰形。若0.1%TFA分離不好,可加大濃度到0.2%,但用完后要及時沖洗色譜柱。
  3、走梯度時走成基線漂移,但對制備影響不大。
  三、降低柱壓的方法:
  采用1%乙酸水溶液和甲醇二元梯度。
  四、提高檢測下限的方法:
  1、如果是等度洗脫,一定要改成單元等度。
  2、盡量采用乙腈-水系統(tǒng)洗脫。乙腈紫外吸收小,相同條件下噪音小。
  五、用水要求:
  不含金屬離子和細(xì)菌。
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