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HPLC色譜概述液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發(fā)展起來的一項快速的分析分離技術，是現(xiàn)代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobilephase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(stationphase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。HPLC是在經典的液相色譜法基礎上發(fā)展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的固定相的柱色譜分離技術。其分離機制與...

高效液相色譜法的發(fā)展歷史1960年代，由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性，為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質，氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界一臺高效液相色譜儀，開啟了高效液相色譜的時代。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅動流動相，使得經典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內完成。1...

高效液相色譜法的原理：高效液相色譜(HPLC)法是以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。高效液相色譜對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。高效液相色譜和氣相色譜在基本理論方面沒有顯著不同，它們之間的重大差別在于作為流動相的液體與氣體之間的性質的差別。高效液相色譜法的構造：可分為”高壓輸液泵”、”色譜柱”、"進樣器”...

1、制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：（1）低壓液相色譜；（2）中壓液相色譜；（3）高壓液相色譜；2、低壓色譜（LPLC）柱壓一般低于5bar（或75psi）。低壓色譜一般是由蠕動泵、進樣閥和檢測器組成，可以連續(xù)化，實現(xiàn)自動的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的，長度一般為240-440mm，內徑為10-40mm。對于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質，光學檢測器很常用。填料一般使用軟質的葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、合成高聚物或離子交換劑，粒徑一般...

制備色譜是指采用色譜技術制備純物質，即分離、收集一種或多種色譜純物質。制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其它用途。制備色譜的出現(xiàn)，使色譜技術與經濟利益建立了聯(lián)系。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩個重要指標。其中，氣相制備色譜主要用于石油化工產品和揮發(fā)性天然產物的色譜純樣品制備。1、分析色譜的目的分析出混合物中一個（或者幾個）純物質的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進樣品量很大，導致...