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高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學、醫(yī)學、工業(yè)、農(nóng)學、商檢和法檢等學科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應用。高效液相色譜儀分析時流動相的選擇原則：1.選擇色譜醇的溶劑作為流動相不要隨意加滿溶劑瓶。作為分析流動相，應避免不必要的浪費，防止污染環(huán)境，危害身體健康。應該根據(jù)樣哦數(shù)量，計算需要使...

中壓制備色譜是一般由泵提供壓力，壓力在5~20bar。中低壓色譜柱與常壓柱、HPLC柱有比較大的不同：在使用是是封閉的，但是可以比較方便的打開與調(diào)節(jié)長度，這與中低壓色譜常常固體上樣相適應的。中低壓制備色譜柱的材質(zhì)主要有塑料柱、玻璃柱、不銹鋼柱三種。中壓制備色譜的主要部件為輸液泵、進樣閥、檢測器、餾分收集器等，早期的中壓液相制備色譜，其輸液泵大流速可達156mL/min，并配有阻尼器，以保證液流的穩(wěn)定；進樣器配有0.5-50mL的不同體積的定量管；檢測器有紫外和示差折光檢測器，...

制備型液相色譜儀的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì)。為了縮短分離時間和提高分離效率，制備型液相色譜的的進樣品量很大，導致色譜柱的分離負荷相應加大，因此必須加大色譜柱填料，增大柱內(nèi)徑和柱長，使用的流動相相對增多。然而，當色譜柱上的樣品負載加大時，往往會導致柱效急劇下降而得不到純產(chǎn)品。制備型液相色譜要解決容量與柱效之間的矛盾，對重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟上來說，要少用填料，少用溶劑，盡可能多的得到產(chǎn)品。一、樣品的前處理：制備型液相色譜柱分離的樣品多，比分析型液相色譜柱更容易受污染，樣品...

液相色譜技術(shù)自發(fā)明以來，由于其高效、高靈敏度等特點，得到了飛速發(fā)展。近年來，伴隨著生物技術(shù)和精細化工的發(fā)展，作為液相色譜分支的制備液相色譜也日益受到重視，成為了生物技術(shù)產(chǎn)品和研究中*的手段。分析色譜與制備色譜的根本區(qū)別在于分離目的不同。分析色譜，反映的是樣品的組成，追求的是高效分離和高靈敏度，不需要收集特定的餾分，洗脫液通常作為廢液來處理。但在制備色譜中，為了節(jié)省投資和操作費用，必須以最少的時間生產(chǎn)最大量的產(chǎn)品。由于目的不同，制備色譜與分析色譜所選用的操作參數(shù)，包括色譜柱尺寸...

HPLC過程中影響待測組分遷移的因素較多，同一組分在不同色譜條件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作條件下，同一組分在不同色譜柱上的保留值也可能有很大差別。因此，在高效液相色譜分析過程中，對定性分析方法提出了更高的要求。（1）利用檢測器的選擇性進行定性將經(jīng)色譜柱分離后的樣品引入并聯(lián)或串聯(lián)的幾種不同檢測器，根據(jù)它們不同的檢測性能，視其出峰情況可以初步判別出未知化合物的具體類別。（2）反相色譜中的“a、C”指數(shù)定性在以硅膠為固定相的反相色譜中，待測組分保留值與流動相組成關(guān)系式...